常有醫(yī)院科研者收集臨床血清樣本檢測(cè)某種細(xì)胞因子的表達(dá)情況，在選擇實(shí)驗(yàn)方法時(shí)難以取舍。WB和ELISA不知道該選擇哪種方法，哪種方法的實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠？有些人說(shuō)ELISA自己包被抗體的話會(huì)比較麻煩，WB相比更加科學(xué)，發(fā)表文獻(xiàn)時(shí)容易被接納。但是血清中沒(méi)有內(nèi)參可以選擇。是不是ELISA實(shí)驗(yàn)操作要簡(jiǎn)單很多，那么又如何來(lái)解決這樣的一個(gè)問(wèn)題呢？上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司資深技術(shù)給您解答這個(gè)疑惑。
一、WB和ELISA的敏感性有所區(qū)別。雖然前者用ECL顯色敏感度可達(dá)pg級(jí)，但不同的樣品來(lái)源和抗體的質(zhì)量，不能保證每次都到這個(gè)級(jí)別;而ELISA可以達(dá)到ng級(jí)。也就是說(shuō)ELISA更適于豐度低的蛋白檢測(cè)。而且由于ELISA檢測(cè)所用的樣品少，也適用于樣品來(lái)源有限的蛋白濃度檢測(cè)。
二、在定量方面，ELISA一般用于定性，定量也可， WB可以做到半定量。
三、ELISA不如WB的特異性好。
四、關(guān)于血清內(nèi)因子的檢測(cè)，如果WB檢得出就不要用ELISA。血清內(nèi)參的問(wèn)題，在ELISA里也一樣存在。操作來(lái)說(shuō)ELISA當(dāng)然簡(jiǎn)單，但由于兩種方法各有優(yōu)點(diǎn)，不能全面相互代替。